国际抗体验证工作小组(International Working Group on Antibody Validation, IWGAV),即一个由在蛋白生物学领域有着不同研究兴趣的国际科学家组成的独立小组于2016年9月5日宣布在Nature Methods期刊上在线公布了他们开发出的初步策略来解决抗体特异性、功能性和可重复性方面至关重要的未被满足的需求。发表了首篇关于验证抗体特异性策略的提议(“A Proposal for Validation of Antibodies.” Nature Methods (2016)。确定了五大“支柱策略”(具体如下),用以指导特定应用中的抗体验证。




敲除/敲低策略 (Knockout / Knockdown)缩写KO/KD。KO/KD样品或细胞系是CRISPR/Cas9技术对靶基因进行敲除(knock out),过siRNA/shRNA对靶基因敲低(knock down,即降低靶基因表达)目的蛋白的样品或细胞系。


过表达目标蛋白 (Protein Overexpression)缩写Overexpression。过表达靶基因,转染目的基因载体,


免疫捕获/质谱分析 (IP/MS Analysis) ,缩写IP/MS。通过使用与目标蛋白特异性结合的抗体分离出目标蛋白,其与MS分析结合(IP-MS)可识别与纯化抗体直接发生相互作用的目标蛋白以及可能与目标蛋白形成复合物的蛋白。


生物特性与正交策略 (Biological and orthogonal characteristics)缩写Orthogonal。以生物特性作为基础,使用非抗体依赖方法对大量样品进行定量,并检测基于抗体和非抗体(例如RNA表达量)定量间的相关性。通过靶蛋白生物学特性变化改变抗体信号,包括蛋白的天然差异表达、基因和蛋白水平变化特点、代谢水平变化以及信号通路改变等特性。例如:1天然差异对照验证部分靶标蛋白天然存在组织、细胞特异性,可以利用多组天然差异表达的细胞或组织作为对照。2 信号通路激动剂与拮抗剂对细胞刺激,造成磷酸化,乙酰化,甲基化,羟基化,瓜氨酰化等修饰水平的变化

独立抗体验证策略(Comparable antibodies )缩写Comparable。使用2种或多种可识别目标蛋白表面不同抗原决定簇的独立抗体并通过对比或定量分析确定特异性。


重组单克隆抗体Recombinant antibodies 体外将抗体基因克隆到高效表达载体中。然后将这些载体导入表达宿主中以产生重组抗体。重组制造的抗体克服了其他抗体制造方法的局限性,为您提供批次间最高水平的一致性、确认的特异性和有保证的长期供应


热销类产品。通常一个目的靶标会有多个抗体货号,不同货号可能因为抗体的种属应用、克隆号、抗原识别位点而不同。当实验对抗体的克隆号、抗原识别位点不做要求时,优选热卖货号即可